Manual Febrile Antigen Kit - Darahpemuda.com

 

MAST® ASSURE FEBRILE ANTIGENS

Penggunaan yang dimaksudkan Suspensi antigen bernoda untuk tes Widal dan Weil-Felix. Untuk identifikasi dan deteksi kuantitatif antibodi spesifik dalam serum manusia tujuan epidemiologis dan diagnostik, terutama dalam penyelidikan demam dan infeksi enterik dengan Salmonellae tertentu, Rickettsiae dan Patogen Brucellae. Mereka cocok untuk perosotan cepat dan tabung tes aglutinasi.

 

HANYA UNTUK PENGGUNAAN DIAGNOSTIK IN VITRO.

 

Isi

               The MAST® ASSURE FEBRILE ANTIGENSTM adalah antigen bernoda (kecuali ditandai) suspensi bakteri yang mati, diwarnai untuk meningkatkan pembacaan tes aglutinasi. Antigen 'O' somatik diwarnai biru dan flagela 'H' antigen berwarna merah dan tersedia sebagai berikut:

 

 

Stabilitas dan penyimpanan

               Simpan belum dibuka pada 2 hingga 8C dalam posisi tegak hingga tanggal kedaluwarsa yang ditunjukkan pada label kemasan. Setelah dibuka, MAST® PASTIKAN ANTIGEN RAMBUT harus disimpan pada suhu 2 hingga 8C dan dapat digunakan hingga tanggal kedaluwarsa yang tertera pada label. Reagen mungkin peka cahaya. Jangan membekukan reagen.

 

Peringatan dan pencegahan

Hanya untuk penggunaan diagnostik in vitro. Amati tindakan pencegahan biohazard yang disetujui dan teknik aseptik. Untuk digunakan hanya oleh yang terlatih dan berkualitas personel laboratorium. Sterilkan semua limbah biohazard sebelum dibuang. Non peralatan sekali pakai harus disterilkan setelah digunakan dengan metode yang sesuai. Tumpahan bahan yang berpotensi infeksius harus diserap dan dibuang seperti di atas. Lokasi tumpahan harus disterilkan dengan disinfektan atau 70%  alkohol. Jangan gunakan pipet melalui mulut. Reagen kontrol mengandung serum kelinci. Itu produk mengandung natrium azida (0,095% b / b) dan ThiomerosalTM (0,0095% w / w) sebagai pengawet. Lihat lembar Data Keamanan Produk. Jangan menghirup atau menelan aerosol - cuci percikan dengan banyak air.

Kewaspadaan analitis:

Jangan ubah prosedur pengujian. Jangan encerkan atau modifikasi reagen dalam bahan apapun cara. Biarkan semua reagen dan sampel mencapai suhu kamar (18 hingga 30C) sebelum digunakan. Jangan menukar reagen dari kelompok kit yang berbeda.

Bahan dibutuhkan tapi tidak disediakan

Persediaan dan peralatan mikrobiologi standar seperti gelas kecil atau plastik tabung, pipet, slide reaksi dengan latar belakang putih. Tongkat pencampur dan 37C dan waterbath 50C.

 

Prosedur

A. Persiapan sampel

Gunakan sampel serum segar yang diperoleh dengan sentrifugasi darah yang membeku. Serum sampel dapat disimpan pada suhu 2 hingga 8C hingga 48 jam atau dibekukan untuk jangka panjang penyimpanan. Jangan gunakan plasma atau panas yang tidak aktif, hemolisis, lipemik atau spesimen serum yang terkontaminasi.

 

B. Prosedur Titrasi Slide Cepat

1.Menggunakan pipet, keluarkan 80μl, 40μl, 20μl, 10μl dan 5μl serum murni pada baris lingkaran berdiameter 3 cm pada slide reaksi.

2. Kocok botol reagen antigen dengan baik dan tambahkan satu tetes cairan yang belum diencerkan suspensi antigen untuk setiap alikuot serum.

3. Aduk rata menggunakan tongkat pencampur dan putar slide.

4. Baca aglutinasi setelah satu menit.

 

C. Prosedur Aglutinasi Tabung

Semua hasil titrasi slide cepat positif harus dikonfirmasi dengan menggunakan berikut ini teknik.

1.     1. Beri label 8 tabung plastik kecil di rak.

2.   2. Dengan menggunakan pipet, masukkan 1,9 ml larutan garam 0,85% ke dalam tabung pertama, dan 1,0 ml ke dalam tujuh sisanya.

3.   3. Dengan menggunakan pipet, keluarkan 0,1 ml serum pasien yang tidak diencerkan ke dalamtabung pertama.

4.     4. Aduk rata isi dengan pipet. Jangan sampai membuat gelembung udara.

5.     5. Keluarkan 1,0 ml dari tabung pertama ke dalam tabung kedua dan aduk rata.

6.     6. Lanjutkan metode penggandaan pengenceran hingga tabung ketujuh dan kemudian buang 1,0 ml dari tabung ketujuh. Tabung kedelapan hanya berisi saline sebagai kontrol dan oleh karena itu tidak boleh mengandung serum apapun.

7.     7. Kocok botol reagen antigen dengan baik sebelum digunakan kemudian tambahkan satu tetes suspensi antigen yang tepat untuk setiap tabung dan aduk rata.

8.     8. Inkubasi tabung sebagai berikut:

 Antigen Salmonella “O” dan Proteus selama 4 jam pada suhu 50C.

 Antigen Salmonella “H” selama 2 jam pada suhu 50C.

 Brucella Antigen selama 24 jam pada suhu 37C.

 Salmonella typhi Vi selama 2 jam pada suhu 37C.

 

Biarkan semua tabung semalaman di lemari es, lalu biarkan mencapai ruangan

suhu sebelum membaca hasilnya. NB: Sangat penting bahwa tabung ditempatkan di dalam air mandi, ketinggian air harus mencapai sekitar 2/3 ke atas tingkat konten tabung. Ini akan mempertahankan arus konveksi di dalamnya tabung dan mencegah hasil yang salah.

 

9.     9. Periksa tabung setelah waktu inkubasi yang sesuai dan periksaaglutinasi.

 

Interpretasi hasil Prosedur Titrasi Slide Cepat

Aglutinasi yang terlihat di lingkaran mana pun dari kartu reaksi adalah indikasi berikut ini menghasilkan prosedur aglutinasi uji tabung yang sesuai. Dengan cara ini prosedur titrasi slide cepat memberikan perkiraan hasil yang diharapkan dalam prosedur aglutinasi tabung.

 

 

Penting bahwa semua pengenceran dalam uji geser dilakukan untuk memungkinkan adanya Efek "prozon" (di mana konsentrasi serum yang lebih tinggi dapat memberikan efek negatif hasil tetapi pengenceran lebih lanjut dapat memberikan hasil yang positif) untuk dikenali dan diabaikan.

Prosedur Aglutinasi Tabung

Tabung harus dibaca setelah waktu inkubasi yang disarankan untuk menghilangkan kemungkinan hasil yang salah. Hasil negatif dan kontrol saline harus ditampilkan tidak ada perubahan tampilan dan harus menunjukkan karakteristik "pusaran" saat disentil. Tabung tidak boleh diguncang. Tes positif akan menunjukkan flokular yang jelas aglutinasi di seluruh tabung. Tabung terakhir menunjukkan tanda-tanda aglutinasi harus diambil sebagai titer untuk tes itu.

Batasan Penggunaan

Telah ditemukan bahwa banyak serotipe Salmonella memiliki antigen somatik dari jenis yang sama. Oleh karena itu, aglutinasi salah satu antigen Salmonella dengan serum manusia tidak boleh dianggap sebagai bukti infeksi oleh satu orang tertentu organisme, melainkan sebagai infeksi oleh organisme dengan struktur antigenik yang serupa. Tes harus dibaca setelah waktu inkubasi yang disarankan untuk menghilangkan kemungkinan hasil yang salah.

Tes terakhir untuk menunjukkan tanda-tanda aglutinasi diambil sebagai titer untuk tes tersebut. Untuk hasil negatif, semua tes harus tetap bersih dari aglutinasi. Banyak populasi atau komunitas dapat menunjukkan tingkat residu antibodi yang tinggi sering kali lebih dari 1/80 - 1/160. Pasien juga dapat menunjukkan tingkat residu yang tinggi antibodi dari infeksi sebelumnya. Untuk tes yang memiliki signifikansi klinis, terjadi peningkatan dalam titer harus dibuktikan bukan hanya titer yang tinggi untuk satu pengujian. Hati kronis penyakit juga telah terbukti menyebabkan peningkatan titer antibodi salmonella. Sampel yang sangat lipemik, hemolitik atau terkontaminasi harus dihindari.

Tes terakhir untuk menunjukkan tanda-tanda aglutinasi diambil sebagai titer untuk tes tersebut.

Untuk hasil negatif, semua tes harus tetap bersih dari aglutinasi. Banyak populasi atau komunitas dapat menunjukkan tingkat residu antibodi yang tinggi sering kali lebih dari 1/80 - 1/160. Pasien juga dapat menunjukkan tingkat residu yang tinggi antibodi dari infeksi sebelumnya. Untuk tes yang memiliki signifikansi klinis, terjadi peningkatan dalam titer harus dibuktikan bukan hanya titer yang tinggi untuk satu pengujian. Hati kronis penyakit juga telah terbukti menyebabkan peningkatan titer antibodi salmonella. Sampel yang sangat lipemik, hemolitik atau terkontaminasi harus dihindari.

Kontrol kualitas

Direkomendasikan bahwa kendali mutu harus dilakukan secara berkala dengan kontrol demam positif dan negatif untuk memverifikasi bahwa tes tersebut bekerja benar. Jangan gunakan reagen jika menunjukkan tanda kerusakan.

Referensi

Bibliografi tersedia berdasarkan permintaan.