UJI KARTU RPR
PENGGUNAAN YANG DIMAKSUDKAN
Remel RPR Card Test adalah tes flokulasi nontreponemal yang
ditujukan untuk deteksi reagin (antibodi antilipoidal) dalam serum manusia
untuk diagnosis serologis dugaan sifilis bila digunakan bersamaan dengan tes
treponemal.
RINGKASAN DAN PRINSIP
Tes Kartu RPR adalah tes nontreponemal untuk deteksi
serologis sifilis, dianjurkan untuk digunakan saat diambil darah vena. RPR Antigen
terdiri dari antigen yang berasal dari sumber yang tidak berhubungan langsungdengan
mikroorganisme treponema. 1-3 Dalam metode ini, partikel karbon antigen
kardiolipin mendeteksi reagin, zat yang ada dalam serum sifilis orang dan
kadang-kadang dalam serum orang dengan akut atau kronis lainnya kondisi.4
Reagin adalah zat mirip antibodi yang dihasilkan dari reaksi mikroorganisme
treponema dengan jaringan tubuh.
Deteksi reagin dalam serum bila digunakan dalam hubungannya
dengan serologis treponema tes bantu dalam diagnosis sifilis.5,6 Penurunan empat
kali lipat titer berikut pengobatan sifilis menunjukkan bahwa pengobatan telah
berhasil; empat kali lipat peningkatan menunjukkan kegagalan pengobatan atau
infeksi ulang Dalam serum yang mengandung reagin, flokulasi terjadi dengan
aglutinasi partikel karbon dalam Antigen RPR.
Gumpalan hitam tampak berlawanan dengan putih latar
belakang yang dapat dibaca secara makroskopis. Sebaliknya, tidak reaktif spesimen
tampak memiliki warna abu-abu terang yang seragam.
TINDAKAN PENCEGAHAN
Produk ini untuk penggunaan diagnostik In Vitro dan harus
digunakan dengan benar individu yang terlatih. Tindakan pencegahan harus
diambil terhadap bahaya bahaya mikrobiologis dengan mensterilkan spesimen,
wadah, dan bahan uji setelah digunakan. Baca dengan cermat seluruh prosedur sebelumnya
melakukan tes apa pun.
1. Potensi
Bahan Berbahaya: Semua serum manusia seharusnya dianggap berpotensi menularkan
dan ditangani dengan tepat. Mengacu pada edisi terbaru dari Keamanan Hayati dalam
Mikrobiologi dan Biomedis Laboratorium untuk informasi penanganan spesimen
manusia 8
2.
Antigen RPR mengandung thimerosal sebagai pengawet, yang mungkin beracun jika
tertelan.
3.
Lihat Lembar Data Keamanan Bahan untuk informasi rinci tentang reagen bahan
kimia.
PENYIMPANAN
Simpan produk dalam wadah aslinya pada suhu 2-8 ° C sampai
digunakan. Begitu kitnya dibuka, simpan Antigen RPR pada 2-8 ° C dan semua
komponen kit lainnya di tempat kering pada suhu kamar. Setelah Antigen RPR
ditempatkan di file botol dispensing plastik itu stabil selama 3 bulan atau
sampai kadaluwarsa tanggal pada kit, asalkan disimpan pada 2-8 ° C. Jangan
membekukan atau memaparkannya suhu ekstrim.
PENENTUAN PRODUK
Produk ini tidak boleh digunakan jika (1) reagen memiliki
penampilan berubah, (2) ada bukti kontaminasi, (3) tanggal kedaluwarsa telah
berlalu, atau (4) ada tanda-tanda kerusakan lainnya.
PENGUMPULAN SPESIMEN DAN PENANGANAN
Gunakan
serum yang dibuat dari darah lengkap yang dikumpulkan tanpa antikoagulan. Biarkan
darah menggumpal sepenuhnya sebelum disentrifugasi. Serum harus bening dan dipisahkan
dari sel segera setelah pengumpulan mungkin. Hemolisis spesimen tidak dapat
diterima untuk pengujian jika bahan cetakan tidak dapat membacany
BAHAN DIBUTUHKAN NAMUN TIDAK TERSEDIA
(1)
Rotator mekanis dengan kecepatan tetap atau disesuaikan hingga 100 rpm,
membatasi lingkaran 3⁄4 inci
(2)
penutup humidifier dengan blotter yang dibasahi atau Spons
(3)
pipet 1 ml
(4)
Lampu pijar intensitas tinggi
(5)
RPR Kontrol Cairan (REF R16307) atau alternatif yang sesuai
(6)
Dikalibrasi pipet, 100 μl, 50 μl
(7)
Tabung reaksi (12 X 75)
(8)
Saline normal (0.85%),
(9)
Serum manusia, tidak reaktif untuk sifilis (untuk prosedur kuantitatif).
PROSEDUR
Persiapan Reagen:
Biarkan Antigen RPR menyeimbangkan suhu kamar. Kocok
perlahan botol selama 10-15 detik untuk menahan antigen. Pasang jarum (disediakan)
ke pas meruncing pada botol plastik kosong. Tarik seluruh isi satu botol
Antigen RPR (3 ml) dengan cara meruntuhkan botol pengeluaran plastik dan
menggunakannya sebagai alat hisap. Beri label mengeluarkan botol dengan nomor
lot Antigen RPR, tanggal kadaluwarsa, dan tanggal yang dimasukkan ke dalam botol.
Jarum dan botol pengeluaran harus dibuang saat seluruh kit
habis. Periksa pengiriman jarum dengan meletakkannya secara kuat di atas pipet
1 ml. Mengisi pipet dengan suspensi Antigen RPR. Tahan dalam posisi vertikal
dan keluarkan 0,5 ml suspensi sambil menghitung tetesan. SEBUAH tingkat
pengiriman jarum 30 tetes +/- 1 tetes dapat diterima. Jika jarum tidak memenuhi
spesifikasi ini tidak boleh digunakan.
Setelah menyelesaikan tes harian, cabut jarum dari
dispenser botol dan bilas dengan air demineral. Ini akan membantu menjaga
kejelasan bagian dari suspensi.Jangan menyeka jarum karena dapat mempengaruhi akurasi
penurunan antigen saat disalurkan.
•
Izinkan Antigen RPR, Kontrol Cairan RPR, dan spesimen uji untuk setarakan ke
suhu kamar sebelum digunakan.
•
Suhu ruangan dan semua bahan uji, termasuk spesimen, harus dipertahankan pada
kisaran 23-29 ° C. Suhu di bawah ini kisaran akan menyebabkan reaksi negatif
palsu dan titer lebih rendah, sementara suhu di atas kisaran memiliki efek
sebaliknya
•
Verifikasi kecepatan rotator mekanis (100 +/- 2 rpm) untuk memastikan hasil
yang dapat direproduksi.
•
Tangani kartu uji dengan memegang tepi kartu; jangan sentuh permukaan sumur
uji.
•
Pengendalian RPR dengan pola reaktivitas yang telah ditetapkan harus disertakan
di setiap uji coba. Kontrol Cairan RPR tersedia secara terpisah nomor referensi
(R16307).
Tes Kualitatif:
1.
Beri label sumur uji pada kartu dengan identifikasi spesimen
2.
Gunakan pipet / pengaduk terpisah untuk setiap benda uji atau kontrol. Pra remas
pipet / pengaduk dan susun spesimen atau kontrol. Membuang 1 tetes jatuh bebas
(50 μl) ke dalam sumur yang sesuai.
3. Menggunakan
sebaliknya, ujung pipet / pengaduk yang diratakan dengan lembut, sebarkan spesimen
atau kontrol atas seluruh lingkaran menggunakan gerakan melingkar.
4.
Kocok perlahan suspensi Antigen RPR dalam botol pengeluaran. Holding botol
dalam posisi vertikal, keluarkan beberapa tetes ke dalam tutupnya untuk
memverifikasi jalur jarum sudah jelas. Keluarkan 1 tetes jatuh bebas ke dalam
setiap spesimen atau kontrol yang berisi sumur. Jangan diaduk; pencampuran suspensi
antigen dan sampel dilakukan selama rotasi.
5. Segera letakkan kartu uji pada rotator mekanis, tutup dengan tutup pelembab, dan putar selama 8 menit pada 100 rpm. catatan: Reaksi positif palsu dapat terjadi karena penguapan jika sampel demikian tidak tertutup dengan benar selama rotasi.
6. Setelah rotasi 8 menit, putar sebentar dan
miringkan kartu ke belakang dan maju dengan tangan 3-4 x untuk membantu
membedakan nonreaktif dari hasil yang minimal reaktif. Segera baca kartunya secara
makroskopis dalam keadaan basah di bawah lampu pijar intensitas tinggi lampu.
Hindari silau saat membaca reaksi.
Uji Kuantitatif (Catatan: Lakukan hanya 2
titrasi per kartu):
1.
Menggunakan pipet yang telah dikalibrasi, keluarkan 50 μl 0,85% saline ke dalam
sumur 2, 3, 4, dan 5. Jangan oleskan garam.
2.
Tambahkan 50 μl spesimen pasien ke dalam sumur 1 dan 2.
3.
Campur isi sumur 2 dengan cara menyedot dan mengeluarkan campuran beberapa
kali, menggunakan ujung pipet yang sama. Hindari pembentukan gelembung.
Pindahkan 50 μl dari sumur 2 ke sumur 3.
4.
Campur isi sumur 3 dengan cara menyedot dan mengeluarkan campuran beberapa kali
dan pindahkan 50 μl dari sumur 3 ke sumur 4. Ulangi masuk suksesi melalui sumur
5. Buang 50 μl dari sumur 5.
5.
Menggunakan pipet / pengaduk terpisah untuk setiap adonan tercampur rata, menyebarkan
campuran ke seluruh sumur.
6.
Kocok perlahan suspensi Antigen RPR di botol pengeluaran. Pegang botol dalam
posisi vertikal, berikan beberapa tetes ke dalamnya tutup untuk memverifikasi
jalur jarum jelas. Buang 1 terjun bebas masukkan ke dalam setiap spesimen atau
kontrol yang berisi sumur. Jangan diaduk; pencampuran suspensi antigen dan
sampel selesai selama rotasi.
7.
Segera letakkan kartu uji pada rotator mekanis, tutup dengan tutup pelembab,
dan putar selama 8 menit pada 100 rpm. catatan: Reaksi positif palsu dapat terjadi
jika sampel tidak tepat tertutup selama rotasi.
8.
Setelah putaran 8 menit, putar sebentar dan miringkan kartu ke belakang dan maju
dengan tangan 3-4 x untuk membantu membedakan nonreaktif dari minimal hasil
reaktif. Segera baca kartu secara makroskopis di keadaan basah di bawah lampu
pijar intensitas tinggi. Hindari silau saat reaksi membaca.
9.
Hasil dilaporkan dalam bentuk pengenceran tertinggi yang menghasilkan a hasil
reaktif, reaktif sedang, atau reaktif minimal sesuai dengan contoh berikut:
10.
Jika pengenceran 1:16 reaktif, siapkan pengenceran lebih lanjut sebagai
berikut: Sebuah.
a. Siapkan
pengenceran 1:50 serum nonreaktif dalam 0,85% garam. Ini akan digunakan untuk
menyiapkan pengenceran spesimen lebih lanjut reaktif pada pengenceran 1:16.
b.
Dalam tabung reaksi kecil (12 x 75 mm) siapkan pengenceran 1:16 serum pasien
dengan menambahkan 0,1 ml serum menjadi 1,5 ml 0,85% garam. Aduk rata.
c.
Keluarkan 50 μl pengencer (disiapkan pada langkah 10.a.) ke dalam sumur 2, 3,
4, dan 5. Jangan tambahkan pengencer ke sumur 1.
d.
Keluarkan 50 μl pengenceran 1:16 serum pasien (dari langkah 10.b.) ke dalam
sumur 1 dan 2.
e.
Campur isi sumur 2 dengan menyedot dan mengeluarkan campuran beberapa kali
menggunakan ujung pipet yang sama. Pindahkan 50 μl dari sumur 2 sampai sumur 3.
f.
Ulangi secara berurutan sampai sumur 5. Buang 50 μl dari sumur 5. g. Lanjutkan
mengikuti prosedur Uji Kuantitatif, langkah 5. hingga 8.
PANDUAN HASIL MEMBACA LINGKARAN RPR
No comments:
Post a Comment