UJI KUALITATIF
Tingkat deteksi 200 IU / mL
1. Biarkan
reagen dan sampel mencapai suhu kamar (20 hingga 30 ° C).
2. Kocok
botol reagen secara perlahan untuk membubarkan dan menahan partikel lateks
dalam larutan buffer. Gemetar yang kuat harus dihindari.
3. Tempatkan
50 µL serum pada satu bagian kaca objek sekali pakai.
4. Tempatkan
satu tetes reagen di sebelah setetes serum.
5. Campur
kedua tetes dengan pengaduk yang menutupi seluruh permukaan bagian slide.
6. Putar
slide secara perlahan selama 2 menit secara manual atau pada pengocok putar
yang disetel pada 80-100 rpm.
7. Cari
ada tidaknya aglutinasi setelah jangka waktu yang disebutkan di atas.
Tingkat deteksi 100 IU / mL
1. Biarkan
reagen dan sampel mencapai suhu kamar (20 hingga 30 ° C).
2. Kocok
botol reagen secara perlahan untuk membubarkan dan menahan partikel lateks
dalam larutan buffer. Gemetar yang kuat harus dihindari.
3. Tempatkan
100 µL serum pada satu bagian kaca objek sekali pakai.
4. Tempatkan
satu tetes reagen di sebelah setetes serum.
5. Campur
kedua tetes dengan pengaduk yang menutupi seluruh permukaan bagian slide.
6. Putar
slide secara perlahan selama 4 menit secara manual atau pada pengocok putar
yang disetel pada 80-100 rpm.
7. Cari ada tidaknya aglutinasi setelah jangka
waktu yang disebutkan di atas.
Interpretasi hasil
Tingkat deteksi 200 IU / mL
Adanya aglutinasi
menunjukkan kandungan antistreptolysin-O dalam serum sama dengan atau lebih
besar dari 200 IU / mL.
Tidak adanya
aglutinasi menunjukkan kandungan antistreptolysin-O dalam serum kurang dari 200
IU / mL.
Tingkat deteksi 100 IU / mL
Adanya aglutinasi
menunjukkan kandungan antistreptolysin-O dalam serum sama dengan atau lebih
besar dari 100 IU / mL.
Tidak adanya
aglutinasi menunjukkan kandungan antistreptolysin-O dalam serum kurang dari 100
IU / mL.
REAKSI POSITIF:
3+ Penggumpalan besar dengan latar
belakang yang jelas.
2+ Penggumpalan sedang dengan cairan agak
buram di latar belakang.
1+ Gumpalan kecil dengan cairan buram di
latar belakang.
REAKSI NEGATIF:
Tidak
ada penggumpalan yang terlihat, suspensi seragam.
UJI SEMIKUANTITATIF
Biarkan reagen dan
sampel mencapai suhu kamar (20 hingga 30 ° C). Persiapan pengenceran serial dua
kali lipat dari serum pada slide (lihat diagram deskriptif untuk tekniknya):
1. Tempatkan
50 µL saline normal pada slide bagian 2 sampai 6.
2. Dengan
menggunakan pipet otomatis, tempatkan 50 µL serum ke slide bagian 1 dan 50 µL
langsung ke dalam tetesan saline normal pada slide bagian 2.
3. Menggunakan pipet yang sama, ambil dan
lepaskan beberapa kali campuran yang dibuat pada bagian 2 dan pindahkan 50 µL
campuran ke bagian 3. Ulangi cara ini secara serial sampai bagian 6, buang 50
µL dari bagian 6.
|
Section
|
1 2
3 4
5 6
|
|||||||
|
Saline
µL |
- 50
50 50
50 50
|
|||||||
|
Serum
µL |
50 50
- - - - |
|||||||
|
Mix
and transfer µL |
|
|
50 50 50 |
|
|
50 50 |
→
|
|
|
Dilution
|
1:1 1:2
1:4 1:8
1:16 1:32
|
|||||||
|
IU/mL
|
200 400
800 1600
3200 6400
|
|||||||
4. Kocok botol reagen dengan lembut dan
tambahkan satu tetes reagen ke setiap bagian.
Campur
kedua tetes menggunakan pengaduk yang menutupi seluruh permukaan bagian slide.
5. Putar slide secara perlahan selama 2 menit
secara manual atau pada pengocok putar yang disetel pada 80-100 rpm.
6. Cari ada tidaknya aglutinasi setelah jangka
waktu yang disebutkan di atas.
Interpretasi hasil
Perkiraan
titer akan sesuai dengan pengenceran serum tertinggi yang masih menunjukkan
aglutinasi yang terlihat jelas (lihat diagram).
Keterbatasan
prosedur
1. Pembacaan hasil setelah lebih dari 2 menit (4
menit pada tingkat deteksi 100 IU / mL) dapat memberikan hasil positif palsu.
2. Kekuatan aglutinasi tidak selalu menunjukkan
konsentrasi antistreptolysin-O relatif. Ketika konsentrasi antistreptolysin-O
melebihi 1500 IU / mL, (750 IU / mL dalam tingkat deteksi 100 IU / mL), reaksi
lemah dapat terjadi karena kelebihan antibodi. Jika diduga konsentrasinya lebih
tinggi dari 2000 IU / mL (1000 IU / mL dalam tingkat deteksi 100 IU / mL),
sampel harus diuji diencerkan.
3.
Titer antistreptolysin-O yang meningkat digunakan sebagai bantuan laboratorium
dalam mendeteksi infeksi streptokokus grup A dan sekuelnya, demam rematik akut,
dan glomerulonefritis pasca-streptokokus. Meskipun peningkatan titer
antistreptolysin-O tercatat pada 80 hingga 85% pasien, diagnosis tidak boleh
dikesampingkan karena hasil tes negatif.
Nilai yang
diharapkan
Meskipun
nilai normal dapat bervariasi dengan usia, musim tahun dan wilayah geografis, 2
titer antistreptolysin-O «batas atas normal» untuk anak-anak prasekolah adalah
kurang dari 100 IU / mL, dan di usia sekolah anak-anak atau dewasa muda
biasanya antara 166 dan 250 IU / mL.5 Bagaimanapun, rata-rata dapat ditetapkan
pada kurang dari 200 IU / mL.
Karena
variasi ini, titer di atas batas atas dapat menjadi indikasi infeksi
streptokokus, tetapi hanya peningkatan titer pengenceran dua kali antara
spesimen tahap akut dan tahap penyembuhan yang dianggap signifikan.2 Setelah
infeksi streptokokus akut, titer antistreptolysin-O biasanya akan meningkat
setelah satu minggu, meningkat ke tingkat maksimum dalam 3 sampai 5 minggu dan
biasanya kembali ke tingkat sebelum infeksi dalam waktu kurang lebih 6 sampai
12 bulan.
Karakteristik
kinerja
Sure-Vue® ASO
dievaluasi (tingkat deteksi 200 IU / mL) dibandingkan dengan tes lateks yang
tersedia secara komersial. Sebanyak 170 sampel dari pasien rumah sakit diuji
mengikuti teknik kualitatif. Studi ini menunjukkan kesesuaian 95,9% antara tes
(sensitivitas 96,7% dan spesifisitas 95,4%). Perbedaan diselesaikan dengan tes
lateks lain yang tersedia secara komersial, dan sensitivitas yang diperoleh
adalah 98,4% dan spesifisitas 98,1%, dengan persetujuan keseluruhan 98,2%
Tiga
orang berbeda menguji pengenceran ganda sampel kuat pada lima hari berbeda, dua
kali setiap hari. Hasil penelitian menunjukkan bahwa reproduktifitas in-house Sure-Vue® ASO (dalam satu pengenceran)
adalah 100%.
No comments:
Post a Comment